導語：如何才能寫好一篇環(huán)保的標語，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

廁所環(huán)保標語【經典篇】

1. 如廁后請勿忘關閉水龍頭。

2. 不需要“涌泉”相報，只需止水之恩。

3. 向前一小步。文明一大步(男)。

4. 前進一小步，文明一大步。

5. 情不在切，貼心就行;“紙”不在多，夠用就行。

6. 一紙一屑煞文明，一舉一動顯文明。

7. 請您”方便”后記得要沖洗。

8. 如廁后請沖水，不要亂丟雜物。

9. 衛(wèi)生用品包好再扔，體諒打掃者的辛勞。

10. 對準了位置解決內急，你好，我好，大家好!

11. 只需舉手之勞，便可清潔一新。

12. 文明向前看一小步。文明一大步。

13. 沖刷精神，一切為用戶著想。

14. 今天你沖了嗎?

15. 請不要在小便池內拉屎。

廁所溫馨提示標語【精選篇】

1. 克服不良習慣，養(yǎng)成文明行為。

2. 來也匆匆，去也沖沖。

3. 沖一沖，你好，我也好。

4. 當我們心情愉快的時候，也別忘了讓廁所的心情和我們一樣愉快喲!

5. 上前一小步，文明一小步，用完快沖水，衛(wèi)生你我他。

6. 輕輕按一下，清新你我他。

7. 按下這里，你會有一個驚喜。

8. 手紙請放紙簍里便后請用水沖洗洗。

9. 設備真可貴，公德不可退。

10. 若您如廁功告成，順手沖水了無痕。

11. 你清潔，我衛(wèi)生，齊齊健身心。

12. 同志們，沖啊!

13. 如果你不給別人方便，你將不能”方便”。

14. 您瞅準了，按這里沖。一般人我不告訴他。

15. 如果你不沖刷廁所，你將是歷史的罪人。

廁所宣傳標語【集錦篇】

1. 干干凈凈牌沖刷器，用過就知道。

2. 拉屎不沖，天理難容!

3. 誰按誰精神，您瞅準了，就按這里。

4. 文明手底下方便你我他。

5. 請您”方便”后一定要：洗刷刷洗刷刷，洗刷刷洗刷刷。

6. 隨手沖一沖，干凈又輕松!

7. 同志們請沖一沖啊!

8. 文明生活從小做起。

9. 飛流直下一兩尺，記得沖水大拇指。

10. 愛護公共設施，是你我應盡的責任。

11. 大環(huán)境，小環(huán)境，干凈才有好心情。

12. 貼近文明，靠近方便。

13. 如廁沖水了無痕，道德水準功告成。

14. 今天，你沖了嗎?

15. 起身沖一沖，大家都輕松。

16. 廁所衛(wèi)生要注意，干凈清潔要保持。

17. 廁所衛(wèi)生要注意，干凈清潔常保持。

18. 匆匆走?別!沖沖再走!

19. 按一按，清潔又流暢。

20. 高高興興方便，輕輕松松沖刷。

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1.衛(wèi)生間環(huán)境衛(wèi)生標語

2.衛(wèi)生間環(huán)境標語

3.創(chuàng)意衛(wèi)生環(huán)保標語

篇2

有關環(huán)保方面的警示標語欣賞1、與自然重建和諧，與地球重修舊好。

2、你的星球需要你，聯(lián)合起來應對氣候變化!

3、保護戈壁植被，防止沙塵污染，保護大氣環(huán)境。

4、沒有地球的健康就沒有人類的健康與自然重建和諧，與地球重修舊好垃圾混置是垃圾，垃圾分類是資源。

5、保護環(huán)境，保存希望。

6、加強環(huán)境宣傳教育，提高全民環(huán)境意識。

7、揀回垃圾分類老傳統(tǒng)，倡導綠色文明新時尚。

8、破壞環(huán)境，就是破壞我們賴以生存的家園。

9、土壤不能再生，防止土壤污染和沙化，減少水土流失。

10、保護環(huán)境是一項必須長期堅持的基本國策。

11、拯救地球，一起動手。

12、不要旁觀，請加入行動者的行列。

13、保護水環(huán)境，節(jié)約水資源。

14、追求綠色時尚，擁抱綠色生活。

15、垃圾回收，保護地球，舉手之勞，參與環(huán)保。

16、今天節(jié)約一滴水，留給后人一滴血。

17、善待地球就是善待自己。

18、讓經濟發(fā)展的浪潮進入綠色的河道。

19、建設美麗的邊疆，愛護我們的家園。

20、破壞環(huán)境，禍及千古，保護環(huán)境，功蓋千秋。

21、把消費限制在生態(tài)圈可以承受的范圍內破壞環(huán)境，禍及千古，保護環(huán)境，功蓋千秋。

22、人類若不能與其他物種共存，便不能與這個星球共存。

23、環(huán)境與人類共存，資源開發(fā)與環(huán)境保護協(xié)調。

24、促綠色消費，做綠色選民。

25、地球是我們從后代手中借來的、環(huán)保不分民族，生態(tài)沒有國界不要旁觀，請加入行動者的行列今天節(jié)約一滴水，留給后人一滴血。

有關環(huán)保方面的警示標語分享1. 熱帶雨林——地球的肺

2. 愛護我們的地球從點點滴滴做起

3. 花草叢中笑，園外賞其貌

4. 酸雨是地球萬物的共同敵人

5. 水-----20億人生命之所系

6. 索取資源力求簡單，利用資源轉化完全

7. 合理利用自然資源，有效保護生態(tài)平衡

8. 欲攬春*入自家，無可奈何成落花

9. 保護生物多樣性

10. 小草對您微微笑，請您把路繞一繞

11. 積極推展減廢運動，落實做好廢棄管理

12. 保護環(huán)境是責任，愛護環(huán)境是美德

13. 遵守法律法規(guī)，防治環(huán)境污染

14. 人人提案創(chuàng)新，成本自然降低

15. 種樹種草，有利環(huán)保

16. 環(huán)境與人類共存，開發(fā)與保護同步

17. 草兒可愛，大家愛

18. 購買尾氣排放達標的汽車

19. 水是生命之源，節(jié)約用水就是保護環(huán)境

20. 地球是我家，綠化靠大家

21. 提高環(huán)境保護意識，愛護我們共有家園

22. 距離產生美，謝絕親密接觸

23. 綠色——生命之源

24. 建設綠色企業(yè)，堅持綠色經營

25. 種一棵樹，種一枝花，世界會更美好

有關環(huán)保方面的警示標語推薦1. 多栽一棵樹，就給人類多增添一絲生存的希望。

2. 朋友，請給鳥兒多一片溫暖的天空，請給魚兒多一點娛樂的天地。

3. 含一滴水，還一份真情!

4. 地球不僅僅是人類的家園，更是所有生物的家園。

5. 用我們的雙手，保護我們的地球。

6. 讓我們?yōu)榈厍驄寢尮餐瑩纹鹨话丫G傘。

7. 我們?yōu)樘烊毁Y源越來越少而傷心，地球為我們破壞資源而哭泣。

8. 利用地球資源是為了人類更好地生存，保護地球環(huán)境是人類為了生存得更久。

9. 保護我們的家園，讓地球充滿綠色。

10. 保護環(huán)境，有益健康。

11. 沒有綠色，生命就沒有希望。

12. 你是否聽見，地球媽媽在哭泣。

13. 把綠色還給地球。

篇3

1、有了您的真心呵護，學校才會更加美麗！

2、學校是我家，人人都愛它。

3、踏破青氈可惜，多行數(shù)步無妨。

4、建設綠色校園，增強環(huán)保意識。

5、給我一片綠，還你一片蔭。

6、請您愛護綠色，綠是生命之源。

7、手上留情花自香，腳下留意草如茵。

8、花木有情報春暉，同學愛護喜心扉。

9、樹木擁有綠色，地球才有脈搏。

10、美化生活，凈化心靈。

11、只要給予一些愛，就能給你帶來郁郁蔥蔥的綠蔭。

12、少一個腳印，多一份芳香。

13、小草給我一片綠，我給小草一份愛。

14、綠色是我們的家園。

15、輕輕地我走了，正如我輕輕地來。（圖書館）

16、綠色明亮了我們的眼睛，是為了讓我們看清足下綠的生命。

17、當你不要我時，請把我送回家。

18、小草對您微微笑，請您把路讓一讓。

19、別在綠色消失時，我們才去后悔。

20、青青小草有生命，請君足下留情。

21、保護學校環(huán)境，共創(chuàng)學生圣地！

22、除了足跡，什么都不能遺留；除了回憶，什么都不要拎走。

23、多一聲謝謝，多一個朋友，多一聲抱歉，多一份寬容。

24、請您足下繞一繞，草兒向您笑一笑。

25、你來繞一繞，我來笑一笑。

26、繞行三五步，留得芳草綠。

27、草兒綠、花兒香，環(huán)境優(yōu)美人健康！

28、芳草依依，大家憐惜。

29、創(chuàng)造綠色時尚，擁抱綠色生活。

30、輕輕抬起你的小腳，我在你的腳下微笑。

31、人人都來愛護它，世界才會更美妙。

32、小花小草傳芳香，請你把路繞一繞。

33、愛無限，綠無邊。

34、編織愛心，保護環(huán)境。

35、你珍惜我的生命，我還你一片綠蔭。

36、注意了，每個人都看見你在這里的一舉一動。（走廊）

37、小草青青，花香飄飄；青草鮮花，應當愛惜。

38、我愛花，我愛草，我愛青青小樹苗。

39、我很怕羞，請別碰我！

40、拯救地球，一起動手。

41、心中有情，腳下留情。

42、創(chuàng)建綠色校園，從你我做起。

43、心動不如行動，去怨不如去干。

44、人類只有好好地對待大自然，大自然才能無限地回報人類。

45、花香陣陣，鳥鳴聲聲?，槵槙暎瑵鉂馇樯?。

46、小草正睡覺，請你勿打擾。

47、環(huán)境好，生活就好。

48、用愛心呵護每一片綠色。

49、請讓我們的腰桿永遠挺直！

50、少一串腳印，多一份綠意。

51、它失去了保護，我們就失去了健康。

52、綠色校園，綠色生活。

53、鮮花還需綠葉扶，學校更需同學護！

54、問壇哪得綠如許，為有大家來愛護！

55、天是藍的，草是綠的，心是純粹的。

56、如果沒有樹木，世界將會暗淡無光。

57、保護環(huán)境，從我做起。

58、你揮一揮袖，不帶走一片云彩。我動一動手，不留下任何紙屑。

59、請讓我們的校園永遠充滿綠色。

60、手下留情花更艷，腳下留情草更翠。

61、一花一草皆生命，一枝一葉總關情。

62、花草樹木都是寶，沒它我就不行了。

63、保護環(huán)境，少說多做，讓校園成為綠色的殿堂。

64、茵茵綠草地，腳下請留情。

65、勸君多走幾步路，莫把草坪當馬路。

66、喝潔凈的水，呼吸新鮮的空氣，這需要您每時每刻愛護環(huán)境！

67、追求綠色時尚，擁抱綠色生活。

68、小草青青，腳下留情。

69、走一走，看一看，花紅柳綠美無限。

70、多一份綠色，多一份健康。

71、花草是我的朋友，請多一份愛護！

72、人人參與環(huán)境保護，個個爭當綠色天使。

73、大路隨你走，別踩在我頭。

74、少一個腳印，多一個生命，不銹鋼水箱。

75、創(chuàng)建環(huán)保模范城市建設環(huán)保綠色家園

76、不要讓白色的面紗罩在我綠色的笑顏上。

77、小草青青，腳步輕輕。

78、綠色象征生命，珍惜生命，環(huán)保第一。

79、水孕育和維持著地球上的生命，誰來關愛水的生命！

80、保護環(huán)境從我做起，愛護學校從學生做起。

81、青青綠葉紅花，豈能肆意踐踏（請勿踐踏草坪）

82、改善民生，共享水利發(fā)展成果

83、綠色，永恒的美；校園，永遠的家！

84、珍惜資源永續(xù)利用，綠化環(huán)境凈化心靈。

85、讓綠色看得見，讓綠色聽得見。

86、青山清我目，流水靜我耳。

87、賞花愛花花更美，觀景惜景景更幽。

88、追求綠色時尚、走向綠色文明。

89、給我一份愛，送你一片綠

90、保障飲水安全，維護生命健康

91、8.節(jié)約為本，治污優(yōu)先

92、你的行動代表花的未來。

93、當你昂首闊步時，我在你腳下。

94、一草一木皆生命，一枝一葉總關情。

95、堅持團結治水，構建和諧流域

96、垃圾箱：請你近距離投籃。

97、全面規(guī)劃，統(tǒng)籌兼顧，推進水利協(xié)調發(fā)展

98、讓校園陽光普照，讓綠色神圣美妙。

99、讓花兒含笑，讓草兒傳情，讓心兒綻放。

100、鳥兒渴望潔凈的天空，人類渴望綠色的家園。

101、小草微微笑，請你繞一繞。

102、人重臉，樹重皮，請勿墻上留痕跡。

103、今天節(jié)約一滴水，留給后人一滴血。

104、撿起片片紙，傳遞深深情。

105、邁步留意地下草，撣指莫折枝頭花。

106、要想校園凈又美，健康文明記心里。

107、節(jié)約用水就是珍惜生命。

108、堅持人水和諧，建設生態(tài)文明

109、花兒以花香回報我們，我們只需腳下留情。

110、環(huán)境你不愛，美景不常在。

111、建環(huán)保模范城市創(chuàng)美好幸福生活

112、節(jié)電環(huán)保標語：節(jié)約能源，大有可為，功在當代、利在千秋

113、保護綠地標語：不要踩我啊。我也會疼的……

114、保護生態(tài)環(huán)境，就是愛護自己。

115、保護環(huán)境，保護自然就是保護人類自己。

116、我們是幼苗，我們都需要呵護。

117、乘陰靠綠樹，美化靠大家。

118、水資源是有限的，生命之河是無限的。

119、同建綠色校園，共享鳥語花香。

120、珍惜水，保護水，讓水造福人類。

121、珍惜水資源，保護水環(huán)境，防治水污染

122、樹環(huán)保之風，迎美好明天。

123、珍愛生靈、節(jié)約資源、抵制污染、植樹護綠。

124、學校一片綠，學生心中一片春。

125、為了美麗家園，請從小事做起。

126、同花兒一起開放，和小樹一起成長。

127、鳥語花香，愛賞共享。

128、幸福生活不只在于豐衣足食，也在于碧水藍天。

129、愛護小草吧，它是春天的信使！

130、保護水環(huán)境，節(jié)約水資源。

131、實施科教興國與可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。

132、學校是我家，保護環(huán)境靠大家。校園是我家，衛(wèi)生靠大家。

133、加強環(huán)境宣傳教育，提高全民環(huán)境意識。

134、伸出你的手，伸出我的手，讓紙屑遠離我們的校園。

135、美好的校園環(huán)境，需要大家共同建設和創(chuàng)造。

136、為了校園更美，請勿摘花。

137、拯救地球就是拯救未來。

138、用我們的愛心，迎來校園的一片綠。

139、自然不可改良、生活可以選擇選擇綠色生活、健康適度消費

140、愛花、愛草、愛樹、愛校園。

141、青草綠樹你我他咱們同住一家

142、學校是我家，綠化靠大家。

143、你栽一棵樹，我栽一棵樹，我們共同為校園添綠。

144、少生孩子多種樹【有點搞笑…】

145、青山清我目、流水靜我耳

146、讓校園成為綠色殿堂。

147、保護環(huán)境就是保護我們自己。

148、除了足跡，我們什么也沒有留下；除了攝影，我們什么也沒有帶走為了子孫后代，請留下一片凈土

149、萬人齊參與，共建‘綠色生命樹’

150、讓綠色的希望從校園萌芽。

151、贊化天地、道法自然

152、保護樹木，就是保護我們人類

153、學校是我家，美化靠大家。

154、讓校園變成綠色家園，讓祖國變成綠色寶庫。

155、珍惜自然資源，共營生命綠色。

156、保護環(huán)境是一項必須長期堅持的基本國策。

157、家園由我來保護。

158、保護樹木是第一。

159、保護地球，就從美化校園開始吧！

160、保護環(huán)境，造福人民。

161、校園整潔，大家開心。

162、綠色——永恒的美；學校——永遠的家。

163、但存方寸地，留與子孫耕。

164、保護藍天碧水。

165、土壤不能再生，防止土壤污染和沙化，減少水土流失。

166、美好校園需要我們共同建設。

167、美麗的校園，美麗的家，永遠的美麗靠大家

168、學校是我家，環(huán)?？看蠹?。

169、郁郁蔥蔥，創(chuàng)新州

170、草木無情皆愿翠行人有情多愛惜

171、環(huán)境與人類共存，資源開發(fā)與環(huán)境保護協(xié)調。

172、人間知音難覓，校園草坪難培。

173、建設美麗的邊疆，愛護我們的家園。

174、校園是我家，美麗靠大家。

175、保護環(huán)境系各人，美化校園靠大家。

176、尊崇自然、敬畏生命

177、環(huán)境保護，人人有責。

178、把綠色帶入校園。

179、美我校園重在每一舉動。

180、環(huán)境保護從我身邊做起。

181、花草樹木對人笑，因為人類愛環(huán)保。

182、我是有生命的軀干，你是有德行的賢君

183、人類離不開花草，就像嬰兒離不開母親的懷抱。

184、1998年6月5日世界環(huán)境日主題是："為了地壞上的生命-拯救我們的海洋"。

185、破壞環(huán)境，就是破壞我們賴以生存的家園。

186、有限的資源，無限的循環(huán)。

187、保護環(huán)境是每一位公民應盡的責任。

188、舉手之勞，美化校園。

189、多種一棵樹，世界上就多一片綠色

篇4

關鍵詞 .net環(huán)境 報表應用與管理 工作效率 優(yōu)化與改進 現(xiàn)實意義

中圖分類號：TP3 文獻標識碼：A

0前言

目前.net環(huán)境下報表的應用研究主要是針對水晶報表設計與實現(xiàn)來進行，因此本次研究工作選取了水晶報表作為研究對象，依據(jù).net環(huán)境下對報表的需求來深入分析報表設計與實現(xiàn)，以此來推動相關研究工作進一步發(fā)展，提高實際報表管理與應用工作效率做出應有的貢獻。

1 基于.net環(huán)境下報表應用需求研究

互聯(lián)網是一個開放性平臺，人們可以隨時隨地通過訪問網絡來搜集感興趣的信息以滿足工作需要，在很大程度上提高了實際工作效率，促進了生活工作方式變革。.net環(huán)境下報表的應用與管理將不再局限于某一個領域，而是通過網絡信息資源的共享與交流來滿足全面具體的應用需求。因此針對報表的應用與開發(fā)對滿足工作需要，推進社會經濟進一步發(fā)展具有重要的促進作用和現(xiàn)實意義。報表開發(fā)與應用也將會朝著多元化發(fā)展，需要在實際工作中不斷研發(fā)與改進，以提高報表的實用性。因此基于.net環(huán)境下報表開發(fā)與應用需要投入較多的精力來給予支持，以確保報表能夠緊隨時展要求，為社會輸出更多優(yōu)質服務。

2 水晶報表概述

2.1水晶報表含義

Crystal Reports（水晶報表）是一款具有良好實用性的商務智能應用軟件，主要用于日常工作中設計以及產生報表。水晶報表是目前世界范圍內最專業(yè)、功能最全、操作性較高的報表應用管理系統(tǒng)，除了能夠滿足日常企事業(yè)單位生產所需之外，還能夠與絕大多數(shù)主流應用工具實現(xiàn)無縫對接，從而延伸了報表的使用范圍，進一步推動了社會無紙化辦公進程，有力的促進了相關行業(yè)發(fā)展，具有重要的推動作用與現(xiàn)實意義。

2.2水晶報表特點

2.2.1操作簡便、快捷

水晶報表相較于傳統(tǒng)報表應用與管理方式具有明顯的優(yōu)勢，在報表數(shù)據(jù)計算與整理過程中不需要將繁雜的數(shù)據(jù)進行捆綁操作，從而有效節(jié)約了工作時間，很大程度上提高了工作效率。同時報表在進行編輯過程中可以通過簡單操作就能夠輕松實現(xiàn)，降低了報表操作與應用難度，使得報表能夠成為日常辦公軟件之一得到有效推廣使用。目前水晶報表應用已經進入了一個高峰階段，所帶來的社會效益與經濟收益在很大程度上推動了社會經濟進一步發(fā)展，日常辦公無紙化進程進一步加快，實現(xiàn)了經濟社會可持續(xù)發(fā)展的總體社會目標。

2.2.2水晶報表程序控制能夠滿足實際所需

水晶報表程序控制程序目前主要有拉（PULL）模式和推（OUSH）模式，根據(jù)實際工作需要選取科學合理的報表控制模式不僅能夠有效節(jié)約工作時間，還能夠在很大程度上促進報表得到優(yōu)化和完善，具有較高的使用價值。在.net環(huán)境下，通過使用水晶報表不同程序控制模式可以有效降低數(shù)據(jù)庫連接消耗程度，提高系統(tǒng)自身的運行性能具有重要的影響作用。隨著計算機不斷普及應用，數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)也將隨之普及，因此為了能夠有效提高數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)運行效率與使用價值，就需要針對報表連接消耗問題進行有效解決，而實際研究也證實了水晶報表程序控制模式確實能夠實現(xiàn)降低連接消耗的目的。

3 .net環(huán)境下報表應用研究

3.1利用向導制作報表

利用向導來制作報表是實際工作中利用程度最高、應用范圍最廣泛的報表生成方法，其主要是通過向導的引導來完成所需要報表的設計與生成工作。具體步驟為：根據(jù)向導指引新建一個網站來添加報表，之后利用已經存在的數(shù)據(jù)源來進行報表內容的進一步加工工作。在報表設計器中通過選取合適的報表以及相應數(shù)據(jù)來進行內容豐富，之后將報表進行導出，如此一來就可以生成一個簡單實用、內容豐富翔實的報表。

3.2動態(tài)生成報表

由于實際工作需要，報表的應用不可能一直沿用固定報表生成模式，往往會因為實際數(shù)據(jù)變動而需要進行編輯改進，如果能夠動態(tài)生成報表將會在很大程度上簡化報表應用管理流程，提高工作效率。因此通過利用ReportViewer，根據(jù)實際所需報表需求來指定顯示報表，自動生成Object Data Source文件，該文件會根據(jù)生成數(shù)據(jù)源時默認定義方法來獲取數(shù)據(jù)庫中已經存在了的數(shù)據(jù)。打開Name="DataSet1_DEPARTMENT"/>，通過重新命名Name就可以針對已有報表按照正常方式來加載數(shù)據(jù)源以及將生成的數(shù)據(jù)添加到報表之中，從而實現(xiàn)了對報表的動態(tài)加載與編輯，生成的報表能夠符合實際動態(tài)需求，具有較高的應用價值。

4總結

綜上所述，.net環(huán)境下報表的應用需要緊隨時展需求，力爭做到與時俱進來滿足工作需要，從而改變傳統(tǒng)辦公模式，將現(xiàn)代化無紙化辦公理念和方式運用在工作生活中，促使社會經濟實現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的總體社會目標。

參考文獻

[1] 孫惠娟，高瑞華.NET環(huán)境下幾種報表解決方案的對比分析[J].河南財政稅務高等?？茖W校學報，2011，12（03）：90-92.

篇5

關鍵詞：簡潔；重點；阻止；感情；思維

中圖分類號：G648文獻標識碼：B文章編號：1672-1578（2017）04-0005-02

"人們運用語言這一社會交際工具，準確、鮮明而生動地表達思想感情，傳遞信息，達到相互了解，從而產生出一定的政治、經濟、社會、宣傳、教育和藝術效益，這就是語言的效果。語言效果是無法估量的，有關專家指出：'語言的力量能征服世界上最復雜的東西--人的心靈'"[1]正因如此，我們就要充分利用環(huán)保警示語為我們的環(huán)保服務。

環(huán)保警示語宣傳和倡導的是環(huán)保理念，借助于警示語的形式，達到警示心靈，制約行為的目的，圍繞共同的目的，雖是簡短的一句話，但表達上各顯神通，因而在環(huán)保工作中卻起到舉足輕重的作用。

1.簡潔的語言標示在萬綠叢中或人來人往的公共場所，可以引起人們的關注

（1） 請勿吸煙。

（2）人類只有一個可生息的村莊--地球，保護環(huán)境是每個地球村民的責任。

這些話語簡單明了，但又有明確的意義，禁止做什么，倡導做什么，在不難理解的句子中讓人一目了然，表達的效果顯著。

2.直接阻止與間接阻止某種行為運用在環(huán)保警示語中，能起到詞必達意的效果

有些是間接阻止某種行為的發(fā)生，例（3）破折號后面是"垃圾筒"的呼告，"我不想'失業(yè)'"，連"垃圾筒"都在努力為環(huán)保做奉獻，何況是有思維能力的人，而"垃圾筒"不"失業(yè)"的方法是要別人去做某事，人們只有自覺地把垃圾放入"垃圾筒"里，才能讓"垃圾筒"不"下崗"，間接阻止了亂吐、亂丟、亂扔、亂放、亂拋垃圾的現(xiàn)象發(fā)生，達到凈化環(huán)境的目的。環(huán)保警示語的語用的最終目的就是要實現(xiàn)保護環(huán)境的目的。

（3）垃圾筒--我不想"失業(yè)"?。。?/p>

一般這種間接阻止的行為不是人對人的講述，它是從另一個角度來說話，人們也許聽不進別人的話，或是聽人說話已聽麻木了，"失業(yè)"的頻率太高了，而現(xiàn)在有存在的第三方有話要說，這是要人們傾聽第三方的聲音，要我們聽聽它們對人類的訴求，易引起人們的共鳴，從而引起人們的同情；同時也讓我們想到，如果連它們都失業(yè)的話，那將是人類的災難，我們還不趕緊行動起來嗎？

這種間接阻止實際采用了言此意彼的委婉的方式，讓人耳目一新，大大提高了"吸睛"率，起到很好的語言效果。

3.環(huán)保警示語有感情，拉近了人與物之間的距離，增強了表達的效果

環(huán)保警示語中修辭格的運用，使環(huán)保警示語帶上了豐富的感情，更好發(fā)揮它的傳情達意的作用，使人類與異類的溝通與交流也就更密切了，看下面的一些語句：

（4）小草在沉睡，請勿打擾他！

（5）小草有生命，承蒙多關照。

（6）愛花的人心靈美如花！

（7）滿園飄香，邀您共賞！

（8）封山育林，造福子孫！

一是用了擬人的辭格，把物當人來寫，把植物的世界人性化，使人與物能互相交流與了解。如"小草在沉睡"，從第三人稱的角度來描情狀物，使小草富有人的情態(tài)，小草就像一個弱小的、正在沉睡中的嬰兒，他就像是你自己的孩子，他的成長需要人們的關愛與保護，這也勾起人們保護弱者的心理，而人類對弱小的生命一向都有愛心，這就傳達了小草需要保護的意愿。再如"邀您共賞"中用的"邀"是有方向性的動詞，把綠色領域中的植物當作人來描寫，有一方存在的同時還希望有他方的加盟，從而達到香飄四方，美化環(huán)境的目的，同時也慰勞你對花草世界的愛護："他"今天有最美一面的展示，有你的功勞，所以請你欣賞。還有就是"小草有生命"，在這句話里省略了喻詞與喻體，完整的一句話為"小草就像是有生命的嬰兒"，何況人類對有生命的東西歷來都關愛與尊重，"承蒙多關照"中的"承蒙"是謙詞，小草的卑微與謙恭易勾起人們的同情心，從而得到更好的關愛與保護。

還有就是對偶的使用，把"結構相同或基本相同、字數(shù)相等、意義上密切相連的兩個短語或句子，對稱地排列"，"從形式上看，音節(jié)整齊勻稱，節(jié)律感強"[3]。像第（9）句中前后句的最后一個字的讀音都押"i"韻；第（10）句"環(huán)保"與"環(huán)境"，"感動"與"牽動"意義是相近、相連的；第（11）句前后兩句話的最后一個字都押"ān"韻。而且句式中的用詞，詞性是相對的，使"句式富有表現(xiàn)力，便于人們記誦"[4]。這樣可以使相似、相近的內容進行比照，使其更好的襯托和突出語義。

（9）草木無言皆青翠， 行人有情多愛惜。

（10）環(huán)保感動中國， 環(huán)境牽動心靈。

（11）綠色與生命時時相伴， 環(huán)境與健康息息相關 。

此外，頂真的運用，例（12），使"連貫的思索之間的遞相依存的內在聯(lián)系作了清楚的闡述，"[5]讓語句的"說理周密謹嚴，表達如行云流水，氣勢貫通"[6]；還有排比修辭格的運用，如例（13），突出了句意，使語言氣勢得到了加強，豐富了環(huán)保警示Z的表情達意的效果，延伸了環(huán)保的廣度，增強了環(huán)保的力度。

（12）垃圾混置是垃圾，垃圾分類是資源。

（13）地球怎么長成，我不知，你不知，他不知.地球怎么滅絕，我知，你知，他知。

還有就是使用婉曲，"即不是直接明白而是含蓄曲折地把自己的意思表達出來。修辭學上把這種方法叫婉曲。運用婉曲手法，可以接近雙方感情上的距離。"[7]如，

（14）除了回憶，請你什么也別帶走。

（15）除了足跡，請你什么也別留下。

（16）當你想丟點什么的時候，請想一想，可千萬別丟臉。

這些話語都沒有嚴厲的制止和訓斥，沒有刺目的、語氣強硬的字眼，如"不準"、"嚴禁"、"罰款"等。有的只是委婉的告誡與和藹的提示，但觀者不難讀懂它要提醒游人要自覺愛護自然景觀，不要采摘花果，不要丟棄任何垃圾，這些引人思考的話語，不難明白它的潛臺詞。通過這些委婉含蓄的話語，催人警醒，激人自律，當看到景區(qū)這些文明的警示語時，誰還忍心摘花采果，亂扔垃圾，損壞這里美麗無比的環(huán)境呢？這種既熱情誠懇，又婉轉含蓄的話語不僅僅起到警示語的作用了，更是文明用語的典范。因為它成功地運用婉曲手法，得體，準確地傳達出環(huán)保者的意圖。

總之，在環(huán)境保護的警示語中運用了修辭格，彰顯了環(huán)保領域以人為本的宗旨，它的人性化的一面，向人們傳播了人文關懷，構建了人文生態(tài)，使人類更容易融入周遭的自然環(huán)境的世界，達到善待、保護、開發(fā)、利用的目的。

4.環(huán)保警示語有思維，使環(huán)境保護領域中的語義更符合人類思維的規(guī)律，達到人與物的交融

語言是思維的載體，根據(jù)語用學"我們用預設來解釋一些語義中的邏輯現(xiàn)象"[8]如果用形象的數(shù)學公式來表示就是"語言學+邏輯推理=預設"，在公式中有邏輯推理的存在，根據(jù)邏輯推理的三段論，那就說明語用預設存在著隱藏起來的前提。而且這個前提具有可推知性的特點，下面以（17）――（21）句為例來例舉這種預設：

通過上面的例舉，我們看到這里主要用了解釋性的預設，它主要是對某種做法做出解釋進行了預設，從而達到告知的目的，而這種預設往往是讓人容易知曉的，如果我們聽不出或看不出那層暗設的前提，那就是語用預設的失誤。我們通過對語義預設的分析，可以了解環(huán)境保護領域中的警示語的使用必須符合邏輯，也就是符合人腦思維的規(guī)律性，真正的讓植物的世界成為人類世界不可或缺的部分。人們才會倍感珍惜這種和睦共處的氛圍，珍愛提供給人類生存的這份綠色環(huán)境，從而讓人類更好的保護地球環(huán)境資源。

5.用"意合法"來鮮明地表明立場、觀點和態(tài)度，講清楚道理，從而讓人接受

這就使有些句子的語義是不需要預設的，不需要回味無窮的，只是為了讓人一看就懂，達到明白曉暢的目的。從語用學的角度看，"有一些復句不用任何關聯(lián)詞語，完全依靠語序以及前后分句的語義制約構成，這就叫'意合法'"[9] 。這類句子的語義一般講環(huán)境保護的意義和作用的為多。如：

（22）綠化環(huán)境，保護家園。

（23）保護綠化環(huán)境，熱愛人類自己的家園。

（24）人類靠綠色環(huán)境生存 ，綠色環(huán)境靠人類保護。

它的表達效果符合人們閱讀審美的習慣，無須過度的思考就可達到人們思想，從而指導人們的行為。像（17）就是如此，首先做"綠化"工作，第二步才是"保護"的工作，語句本身就有符合人們行為習慣的語序，前一句的"綠化"的動作是后一句"保護"的前提條件，后一句動作"保護"是前一句"綠化"的行為結果，也就是說，有"綠化"緊接著為鞏固勞動成果就要實施"保護"。這些詞語的使用，頻率也是很高的，296句中占了1/3強，符合人們的性情，講明白話，做明白事，直接警示"綠化"、"保護"的主題，使人易于接受。（23）、（24）也是如此，其他就不一一例說，總之，這種句子表達出來的語義就是要明白曉暢，達到植入人們心尖的效果。

在h境保護領域中，我們對環(huán)保警示語在表達效果上進行探究，能更好地通過對環(huán)保警示語的運用，把大家的積極性調動起來，只有讓大家積極的行動起來，才能真正起到保護環(huán)境，凈化環(huán)境，美化環(huán)境的目的，這也為優(yōu)化我們的生活質量奠定了環(huán)境基礎。

參考文獻：

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[2]《現(xiàn)代漢語?下刪》黃伯榮，廖序東主編.-4版-北京：高等教育出版社，2007.6（2010重印）.P184頁

[3]、[4]同上.P206頁

[5] [6]《現(xiàn)代漢語?下刪》黃伯榮，廖序東主編.-4版-北京：高等教育出版社，2007.6（2010重?。?P212頁

[7]傅炳民 汪欣著《說寫辨賞學語文》-武漢：武漢大學出版社，2006.6.P3頁

篇6

【關鍵詞】 調節(jié)性T細胞； 弱精癥； 免疫破壞； 免疫抑制細胞因子

【Abstract】 Objective： To observe the change pattern of CD4+CD25+ regulatory T cells （Treg） in asthenospermia infertile patients and the correlation with sperm quality.Method： The peripheral blood and prostatic fluid specimens were collected from 60 asthenospermia infertile patients as the observation group and 36 healthy volunteers as the control group. The flow cytometry was used to determine the volume of Treg， intracellular transforming growth factor β1 （TGF-β1） and interleukin 10 （IL-10） in the peripheral blood and prostatic fluid.The correlation of the above three substances of sperm viability and motility rate were analysed.Result：Compared with control group，the observation group patients of Treg， IL-10 and TGF-β1 asthenospermia infertile had significantly lower volume in their peripheral blood and prostate massage fluid，the differences were statistically significant（P0.075，P

【Key words】 Regulatory T cells； Asthenospermia； Immunity damage； Immunosuppressive cytokines

First-author’s address：Shantou Chaoyang District Dafeng Hospital，Shantou 515100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.09.009

近年報道弱精癥導致不育的案例越來越多，該類患者甚至連慢性前列腺炎的病史都不具備，其機制不明，因此給治療帶來困難。有研究表明免疫因素可能是弱精癥的重要發(fā)病機制[1]。國外有報道CD4+CD25+調節(jié)性T細胞（Treg）與不育癥相關，但目前國內關于弱精癥患者Treg變化的研究不多。因此筆者以此為切入點，重點觀察了弱精癥與健康成年男性外周血Treg及血常規(guī)的變化，發(fā)現(xiàn)弱精癥患者Treg數(shù)量明顯降低，且與Treg功能密切相關的細胞因子IL-10及TGF-β1亦表現(xiàn)為數(shù)量不足。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究以2013年1月-2014年12月本院泌尿外科門診及病房接診的60例弱癥患者為觀察組，平均年齡（35.3±9.3）歲，平均病程（5.6±1.5）年。入選標準如下：所有患者均為婚后性生活正常，未采取任何避孕措施而不育1年以上，女方生育力檢查正常，男方無生殖系統(tǒng)發(fā)育異常、無生殖系統(tǒng)感染、無精索靜脈曲張、精道梗阻、逆行或不等疾?。粎?shù)中前向運動的（a和b級）

1.2 實驗材料 鼠抗人CD4-FITC單抗，CD25-PE單抗及同型對照IgGI-FITC，IgG -PE，均為B&D公司產品。流式細胞儀為Beckman公司產品（型號：EPICS-XL）。IL-10及人TGF-β1的血清及前列腺液ELISA試劑盒購自南京建成生物工程研究所。淋巴細胞分離液（AXIS-SHIELD公司）、RT-PCR試劑盒及Tregizol RNA提取試劑盒均購自武漢博士得生物科技有限公司，PE9600型PCR擴增儀（美國PE公司）[2]。

1.3 標本采集 外周血：清晨采集以上觀察對象的靜脈血約2.0 mL，采用肝素鈉抗凝；：采用法采集約1～3 mL，采用肝素鈉抗凝；前列腺液：采用前列腺按摩法，采集前列腺液約0.5～1.0 mL，采用肝素鈉抗凝[4-7]。

1.4 檢測方法 外周血：采用淋巴細胞分離液常規(guī)分離外周血單個核細胞（PBMC），用含10%小牛血清的RPMI-1640調細胞至106/mL，取200 μL細胞分別加入抗CD4-FITC、抗CD25-PE的單克隆抗體各20 μL，同型對照分別為IgG1-FITC、IgG-1-PE，混勻后避光孵育25～30 min，PBS洗滌2次。將細胞懸浮于0.5 mL PBS洗滌液中，振蕩混勻后上機檢測[3]。同法檢測前列腺液及外周血IL-10、及TGF-β1的含量。：使用質量分析儀檢測存活率、平均運動速度、活力指數(shù)等指標。

1.5 統(tǒng)計學處理 運用統(tǒng)計軟件包SAS 8.1對本研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，計量資料采用（x±s）表示，符合正態(tài)分布及方差齊者采用t檢驗比較組間差異，不符合正態(tài)分布者采用秩和檢驗，指標之間的相關性分析采用Pearson參數(shù)法，以P

2 結果

2.1 兩組患者Treg及細胞因子比較 觀察組患者外周血CD4+CD25+ Treg、外周血及前列腺液的TGF-β1和IL-10均顯著低于對照組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P

2.2 兩組常規(guī)比較 兩組量比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；觀察組活率、運動速度和ATP含量指標均顯著低于對照組，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P

2.3 相關性分析 經Pearson檢驗，CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運動速度、ATP指標之間均呈正相關性（r>0.075，P

3 討論

弱癥占所有男性不育致病因素的半數(shù)以上，引發(fā)弱癥的原因很多，主要有生殖道感染、免疫因素、精索靜脈曲張、內分泌因素以及先天性疾病等[4-9]。目前弱癥的免疫發(fā)病機制尚未明確，是其治療效果欠佳的主要原因之一。Treg細胞是近年發(fā)現(xiàn)的一群具有獨特免疫調節(jié)作用的抑制性T細胞[4]。本研究從T細胞免疫學角度研究弱癥患者調節(jié)性T細胞及其細胞因子的表達，總結弱癥患者Treg及其細胞因子的變化規(guī)律，以及弱癥患者CD4+CD25+ Treg及其細胞因子含量與質量的相關性[10]。研究結果表明，觀察組外周血CD4+CD25+ Treg的含量顯著低于對照組，外周血的TGF-β1和IL-10顯著低于對照組；觀察組前列腺液的TGF-β1和IL-10顯著低于對照組；外周血的TGF-β1和IL-10均顯著高于前列腺液；兩組量比較差異無顯著性；觀察組活率、運動速度和ATP含量指標均顯著低于對照組；經Pearson檢驗，CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運動速度、ATP指標之間均呈正相關性。

CD4+CD25+ Treg在前列腺的免疫失衡中起到重要作用[11]。Treg活化后不僅能抑制CD4+和CD8+ T細胞的活化和增殖，還可抑制組織內由于T細胞免疫殺傷過度所致的免疫性損傷，因此Treg具有下調及抑制免疫的功能[12]。Foxp3是一個重要的蛋白，其可促使初始（未成熟）T細胞向Treg轉化，因此Foxp3是Treg的主要功能因子，前者的減少可導致Treg功能的缺陷[5]。在Treg所分泌的細胞因子中，IL-10與TGF-β1所占的位置最為重要：TGF-β1可促進Foxp3基因的克隆表達，而后者是發(fā)揮免疫抑制功能的主要功能因子[13-14]。除TGF-β1外，作為白介素家族重要成員的IL-10，具有抑制炎性反應、預防自身免疫現(xiàn)象出現(xiàn)的生物學作用，因此缺乏IL-10可導致一系列自身免疫病如腸炎或腦脊髓膜炎（EAE）的發(fā)生[15]。

本文以上述背景為理論依據(jù)，從免疫調節(jié)的角度觀察弱精癥的發(fā)病機制，通過直接檢測外周血Treg數(shù)量發(fā)現(xiàn)該T細胞在弱精癥患者的表達明顯降低，且發(fā)現(xiàn)外周血及前列腺液當中該細胞的功能因子TGF-β1及IL-10均顯著降低，這進一步印證了不論在全身抑或前列腺組織局部，都表現(xiàn)為Treg數(shù)量的減少及功能的不足。其原因可能是：弱精癥患者降低使IL-10不足以抑制單核細胞的活化與增值，導致單核細胞過度執(zhí)行抗原提呈功能，后者致使外周血及前列腺局部的免疫反應過強，使前列腺導管和腺泡不斷受到免疫損害而導致生精功能減退等臨床表現(xiàn)[14]。

綜上所述，對于弱癥患者而言，CD4+CD25+ Treg含量和功能的異常，導致TGF-β1和IL-10細胞因子減少進而引發(fā)免疫抑制功能下降，導致了前列腺的免疫反應過強產生了抗抗體，影響的活動能力、運動能力以及穿透能力。因此，CD4+CD25+ Treg免疫異常是弱癥發(fā)病的重要影響因素。

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篇7

關鍵詞: 癌，肝細胞;β-連環(huán)蛋白;免疫組織化學

摘 要:目的 研究β-連環(huán)蛋白在原發(fā)性肝細胞癌中的表達及其與原發(fā)性肝細胞癌分化、侵襲轉移和預后的關系. 方法 應用免疫組織化學方法對63例原發(fā)性肝細胞癌石蠟包埋標本進行β-連環(huán)蛋白半定量檢測. 結果 有49例（78%）原發(fā)性肝細胞癌β-連環(huán)蛋白陽性表達，低分化癌的β-連環(huán)蛋白陽性率明顯高于高分化癌（P

Keywords:carcinoma，hepatocellular;β-Catenin;immuno-histochemistry

Abstract:AIM To investigate theβ-Catenin expression in primary hepatocellular carcinoma and its relation ship with tumor differentiation，AFP level，invasion，metastasis and prognosis.METHODS β-Catenin expression was detected in63cases of primary hepatocellular carcinoma by using im-munohistochemical technique（DAB method）.RESULTS Expression ofβ-Catenin in77.89%cases of primary hepato-cellular carcinoma and15%cases of liver cirrhosis was stronger than that in the surrounding normal liver tissue.The positivity rate ofβ-Catenin was higher in poorly differen-tiated carcinoma group than that in well differentiated group（P

0 引言

原發(fā)性肝細胞肝癌（HCC）是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機制和發(fā)病原因至今未明.已有報道，一些細胞因子在正常細胞中異常表達，或正常細胞內不應出現(xiàn)的某些因子反而出現(xiàn)聚集狀態(tài)，將啟動不同的信號轉導途徑，直接或間接地影響核內某些基因的表達，導致細胞增殖過度，引發(fā)腫瘤［1，2］ .

β-連環(huán)蛋白（β-Catenin）作為細胞內的一種蛋白質，既是Wnt信號傳導途徑中關鍵調控因子，又與細胞間粘附作用有關，而這兩種作用與腫瘤發(fā)生、發(fā)展均有密切關系［3］ .已有報道稱在大腸癌、肺癌、腎癌等腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)癌細胞胞質內β-Catenin表達增加［4-6］ ，但其在肝癌中的表達及其臨床意義的報道在國內還很少.我們應用免疫組織化學方法檢測63例原發(fā)性肝細胞癌石蠟包埋標本中β-連環(huán)蛋白的表達，并探討其臨床意義，為防治提供依據(jù).

1 材料和方法

1.1 材料 1988/2001第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院普外科手術切除的原發(fā)性肝細胞癌病例標本63（男46，女17）例，年齡36～72（平均55）歲.按1991年WHO病理分類標準，肝細胞肝癌63例，其中Ⅰ級14例，Ⅱ級16例，Ⅲ級33例，其中手術時發(fā)現(xiàn)肝外淋巴結轉移16例.另取肝硬化20例，正常肝組織10例.

1.2 試劑 兔抗人β-catenin多克隆抗體（附陽性對照片）、SABC試劑盒、DAB顯色試劑盒均為武漢博士德生物制品公司產品.

1.3 方法 標本均經40g?L-1 多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片，分別進行HE染色及免疫組化染色，切片常規(guī)脫蠟至水，H2 O

2 滅活內源性過氧化物酶，微波修復抗原，正常山羊血清封閉，分別滴加β-catenin一抗，4°C過夜，滴加生物素化二抗，DAB顯色，蘇木精復染，脫水透明封片，將β-catenin染色陽性的肝癌組織作為陽性對照，空白對照選擇PBS代替一抗.

1.4 βCatenin染色結果判定標準 按腫瘤細胞著色強度及陽性細胞分布范圍分為3個等級:全片未見著色或極少量細胞散在著色為（-），胞質和胞膜棕黃色著色為陽性，10%～30%細胞著色但鏡下易觀察到為（+），大于30%細胞清晰著色為（）.

統(tǒng)計學方法:免疫反應結果及其臨床病理參數(shù)的關系采用χ2 檢驗，生存率計采用壽命表法，不同分組間生存率差異使用時序檢驗.

2 結果

2.1 βCatenin在HCC中表達的臨床病理學特點 β-Catenin以膜定位為主，在10例正常肝組織中無1例陽性表達;20例肝硬化組織中僅3例（15%）呈（+），且主要定位于肝細胞膜的接觸面和膽小管面，未見肝細胞的血竇面和胞質著色;而63例HCC中有49例（78%）標本β-Catenin呈陽性表達，且36例為（）表達，主要定位于肝癌細胞的外周胞質、血竇面、接觸面和腺腔面.胞質β-Catenin陽性著色為點狀著色或片狀淺著色，胞膜β-Catenin陽性著色為不規(guī)則線狀或顆粒狀著色.在靠近毛細胞膽管腔面和小膽管腔面常見肝癌細胞陽性深著色.β-Catenin的分布呈異質性:有大片細胞廣泛表達，小片細胞區(qū)域表達，散在表達或大片細胞中僅數(shù)個細胞表達（Fig1，2）.肝癌組織和非肝癌組織的β-Catenin表達亦呈異質性:肝癌組織β-Catenin表達為外周胞質點狀或片狀淺著色，粗大的胞膜不規(guī)則線狀、點狀著色，偶見胞核深染;而非肝癌組織大都陰性表達，或少量的胞膜線狀、點狀著色.β-Catenin的表達與腫瘤的分化程度呈反比，即分化差時β-Catenin的表達趨于增多.Ⅰ級中（-）8例、（+）表達1例、（）表達5例;Ⅱ級中（-）2例、（+）表達5例、（）表達9例;Ⅲ級中（-）4例、（+）表達7例、（）表達22例.3組比較，差異有顯著性（P

2.2 βCatenin與患者AFP水平及預后的關系 β-Catenin的陽性表達與HCC患者AFP水平呈正比，即AFP水平越高者β-Catenin陽性表達越強，AFP400μg?L-1 組分別為3，8，23例.二組之間存在顯著性差異（P

3 討論

HCC的發(fā)生、發(fā)展是一個多基因參與、多因素影響、牽涉多條信號傳導途徑的復雜過程.Wnt信號轉導途徑異常是目前研究腫瘤發(fā)生機制的一個熱點.而β-Catenin正是這一傳導通路的關鍵調控點［7］ .本實驗結果顯示，49/63的HCC標本中β-Catenin呈陽性表達，且表達程度與HCC的病理分級、術后存活時間呈負相關，與患者AFP水平，有無淋巴結轉移呈正相關.表明β-Catenin在HCC發(fā)生、發(fā)展過程中的作用不容忽視.β-Catenin被發(fā)現(xiàn)是一種與跨膜粘附分子鈣粘著素（Cadherin）相連的胞內特異蛋白，以復合體形式存在于各類上皮和某些實質細胞中，介導細胞間連接，近幾年研究發(fā)現(xiàn)，β-Catenin作為一種關鍵Wnt蛋白，與APC，GSK-3β復合、解離、胞質積累、入核，作用于核內轉錄因子TCF/LEF家族，促進基因轉錄［8-11］ ，或刺激增殖，或抑制凋亡，從而認為β-Catenin是一種癌基因［12］ .其致癌機制可能是發(fā)生在氨基端的突變使變異的β-Catenin大量積累而激活了轉錄因子.Yi等［13］ 報道β-Catenin/APC介導的Wnt途徑的突變占肝癌發(fā)生的30%.關于癌細胞胞質內β-Catenin表達增加的原因，目前的看法主要是其降解減緩，而非生成增加.影響β-Catenin降解的因素有Wnt信號的增強，APC的突變以及β-Catenin本身的突變等.在Rubinfeld等［14］ 對黑色素瘤細胞系的研究中，發(fā)現(xiàn)β-Ccatenin的增加主要與其本身的突變有關，β-Catenin突變后可增加其穩(wěn)定性，使其不被降解.Wnt信號的增強可以抑制APC對β-Catenin的降解作用.此外，也有報道發(fā)現(xiàn)，3個大腸癌細胞系中均有β-Catenin表達的增強，認為大腸癌癌細胞的增殖與轉化與β-Catenin靶基因的持續(xù)轉錄關系密切，β-Catenin的靶基因可能就是大腸癌的癌基因

［15］ .

本研究結果顯示，β-Catenin在腫瘤較靠近血竇、毛細膽管處表達較強，同時與腫瘤病理分級負相關，提示可以將β-Catenin作為分化差、易浸潤轉移的標志物;β-Catenin表達與AFP表達相關，可以協(xié)同原發(fā)性肝癌的臨床診斷;手術標本中β-Catenin的表達情況可以作為判斷患者預后的一個指標.

參考文獻

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［13］Yi Sun.The molecular pathogenesis of hepatocellular carcinoma ［J］.Foreign Med Sci，2001;21（2）:108-110.

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關于對江蘇興聯(lián)電子科技有限公司

年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸項目

環(huán)境影響報告表的批復

                    

江蘇興聯(lián)電子科技有限公司：

你公司委托蘇州品潤環(huán)境評價有限公司環(huán)評工程師吳媛（資格證書編號：2014035320350000003512320748）主持編制的《江蘇興聯(lián)電子科技有限公司年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸項目環(huán)境影響報告表》（以下簡稱《報告表》）收悉。經研究，批復如下：

一、根據(jù)《報告表》評價結論及寺巷街道預審意見，在落實《報告表》中提出的各項污染防治和環(huán)境風險防范措施的前提下，從生態(tài)環(huán)境角度考慮，同意該項目在泰州經濟開發(fā)區(qū)振興西路666號公司現(xiàn)有廠區(qū)內建設，總投資15000萬元，在預留空地內新建生產車間33000m2，購置高速放線機、高速印字機、高速收線機、束絲機、剪板機、折彎機、卷板機、焊接機、自動焊接機等加工設備180臺（套）。建成后形成年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸。具體產品方案詳見《報告表》，你公司不得擅自擴大生產規(guī)模、改變生產工藝和產品方案。

二、在項目工程設計、建設和運行管理中，你公司須認真落實《報告表》中提出的各項環(huán)保要求，嚴格執(zhí)行環(huán)保“三同時”制度，確保各類污染物達標排放，并須著重做好以下工作：

（一）施工期必須采取有效措施減緩環(huán)境影響，切實做好施工噪聲、揚塵、固體廢棄物和廢水的污染控制及治理。

（二）排水系統(tǒng)嚴格實施雨污分流、清污分流。項目無生產廢水；生活污水經化糞池預處理后，接入市政管網送亞同環(huán)保水處理有限公司集中處理；冷卻水定期補充損耗，不外排。

（三）強化廢氣收集措施，落實各類廢氣凈化技術，確保治理設施正常運行，處理效率及排氣筒高度應達到《報告表》提出的要求，加強車間、危廢暫存間等區(qū)域的無組織廢氣控制。浸錫、押出和印字廢氣均有效收集，經“二級串聯(lián)活性吸附”裝置處理后，分別通過15米高排氣筒（1#、2#、3#、4#）排放；危廢暫存間廢氣有效收集，經“活性炭吸附”裝置處理后通過15米高排氣筒（5#）排放。

廢氣排放執(zhí)行《大氣污染物綜合排放標準》（GB16297-1996）、《惡臭污染物排放標準》（GB14554-93）、《《揮發(fā)性有機物無組織排放控制標準》（GB37822-2019）相關要求。

（四）項目設計、施工和建設中應選用低噪聲設備，合理布局設備，采取有效的減振、隔聲等降噪措施。運營期廠界噪聲執(zhí)行《工業(yè)企業(yè)廠界環(huán)境噪聲排放標準》(GB12348-2008)中 3類標準，施工期噪聲應符合《建筑施工場界環(huán)境噪聲排放標準》（GB12523-2011）要求。

（五）一般固體廢物、生活垃圾、危險廢物須分類收集、分類處理處置。按照“資源化、減量化、無害化”的原則和環(huán)保管理要求，落實各類固廢的收集處理處置和綜合利用措施，實現(xiàn)固廢全部綜合利用或安全處置。廢拉絲液（HW09/900-007-09）、拉絲污泥（HW09/900-007-09）、廢膠塞（HW49/900-041-49）、廢活性炭（HW49/900-039-49）、廢油（HW08/900-217-08）、廢包裝桶（HW49/900-041-49）等危險廢物，須委托具備危險廢物處置資質的單位安全處置；廢邊角料、不合格品、廢錫渣、廢包裝材料出售綜合利用；生活垃圾委托環(huán)衛(wèi)部門定期清運處置。危險廢物暫存場所應按《省生態(tài)環(huán)境廳關于進一步加強危險廢物污染防治工作的實施意見》（蘇環(huán)辦〔2019〕327號）、《危險廢物貯存污染控制標準》（GB18597-2001）及修改單要求設置，一般廢物暫存場所應按《一般工業(yè)固體廢物貯存和填埋污染控制標準》（GB18599-2020）及修改單要求設置。

（六）做好土壤和地下水污染防治工作。落實《報告表》中提出的源頭控制、分區(qū)防滲要求，危廢暫存間、拉絲液池等區(qū)域采取重點防滲措施，制定地下水監(jiān)控和應急方案。

（七）按照《江蘇省排污口設置及規(guī)范化整治管理辦法》的要求，完善各類排污口和標志設置。本項目依托現(xiàn)有1個污水接管口和1個雨水接管口及1個廢氣排放口，新增4個廢氣排放口。

三、本項目VOCs排放量經泰州市生態(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局審核同意。本項目建成后，污染物年排放量不得突破《報告表》中核定的排放量。

四、按照《關于做好生態(tài)環(huán)境和應急管理部門聯(lián)動工作的意見》（蘇環(huán)辦〔2020〕101號）的相關要求，對環(huán)境治理設施開展安全風險辨識管控，健全內部污染防治設施穩(wěn)定運行和管理責任制度，嚴格依據(jù)標準規(guī)范建設環(huán)境治理設施，確保環(huán)境治理設施安全、穩(wěn)定、有效運行。

五、本項目應當在啟動生產設施或者在實際排污之前申領排污許可證，未取得排污許可證的，不得排放污染物。項目建設必須嚴格執(zhí)行配套建設的環(huán)境保護設施與主體工程同時設計、同時施工、同時投產使用的環(huán)境保護“三同時”制度。主體工程和環(huán)保設施建成后，你公司須按規(guī)定程序實施竣工環(huán)境保護驗收。

六、請?zhí)┲菔猩鷳B(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局負責該項目相關管理工作，泰州市生態(tài)環(huán)境綜合行政執(zhí)法局負責該項目的現(xiàn)場執(zhí)法監(jiān)督檢查工作。

七、項目的性質、規(guī)模、地點、采用的生產工藝或者防治污染、防止生態(tài)破壞的措施發(fā)生重大變動的，應當重新報批項目的環(huán)境影響評價文件。自本批復文件批準之日起，如超過5年方決定工程開工建設的，環(huán)境影響報告書應當報我局重新審核。

 

 

泰州醫(yī)藥高新技術產業(yè)開發(fā)區(qū)管理委員會

                    2021年6月22日

 

 

篇9

【關鍵詞】 銀屑??；淋巴細胞；受體CXCR3；趨化因子，CXC

Expression of CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with psoriasis

【Abstract】 AIM: To investigate the expression of chemokine receptor CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with progressive plaque psoriasis and its correlation with Psoriasis Area and Severity Index (PASI). METHODS: Reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RTPCR) was applied to semiquantitatively analyze CXCR3 mRNA expression in peripheral blood

lymphocytes and neutrophils from 33 psoriatic cases， 16 cases with about 70% remission of the 33 patients after treatment and 30 healthy controls. The correlation between CXCR3 mRNA expression and PASI was evaluated. RESULTS: CXCR3 mRNA level in lymphocytes from psoriatic patients was 1.12±0.81， markedly higher than that in normal controls （0.28±0.28， P

【Keywords】 psoriasis; lymphocytes; receptor CXCR3， chemokines， CXC

【摘要】 目的： 了解銀屑病患者外周血淋巴細胞與中性粒細胞中CXC型趨化因子受體CXCR3 mRNA的表達水平及其與銀屑病皮損面積和嚴重程度指數(shù)（PASI）之間的關系. 方法： 應用逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR）法檢測進行期斑塊型銀屑病患者33例及其中16例患者治療后外周血淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的表達水平，設30例健康人作為正常對照，并將檢測結果與PASI進行了相關性分析. 結果： 斑塊型銀屑病患者外周血淋巴細胞中CXCR3 mRNA表達水平為1.12±0.81，明顯高于健康對照組（0.28±0.28， P

【關鍵詞】 銀屑??；淋巴細胞；受體CXCR3；趨化因子，CXC

0引言

銀屑病的病理特征之一為表皮和真皮中白細胞浸潤，其中主要為中性粒細胞及淋巴細胞. 趨化因子是主要使細胞發(fā)生趨化作用的細胞因子，分為CXC， CC， XC及CX3C四型. 趨化因子通過與其特異性受體結合發(fā)揮作用，相應的趨化因子受體也分為CXC， CC， XC及CX3C四型. 大量研究結果顯示趨化因子及其受體系統(tǒng)參與了炎癥的發(fā)病機制，尤其與炎癥細胞向皮損局部的移行關系密切. 銀屑病患者外周血中性粒細胞中趨化因子受體CXCR1與CXCR2 mRNA的表達增高，可能參與了中性粒細胞的活化及其向皮損部位的趨化［1］. CXCR3為CXC型趨化因子干擾素誘導的單核因子（Mig）及干擾素誘導蛋白10（IP10）的特異性受體，有報道Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達［2］. 目前對銀屑病患者外周血淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3的表達情況仍不明確.

1材料和方法

1.1材料明確診斷的中、重度進行期斑塊狀銀屑病患者33例，均為200203/200212在中國醫(yī)學科學院皮膚病醫(yī)院就診的門診或住院患者，其中男19例，女14例，年齡18~65歲，病程4 mo~40 a. 用銀屑病皮損面積和嚴重程度指數(shù)（ psoriasis area and severity index， PASI）來評估患者的疾病嚴重程度. 入選標準： 年齡在18周歲以上，臨床診斷明確，PASI評分在8.4以上；近3 mo內未用過維甲酸制劑、皮質類固醇激素及免疫抑制劑，1 mo內未用過治療銀屑病的內服及外用藥物，無其他系統(tǒng)性疾病或皮膚疾?。慌曰颊吲懦龖言?、哺乳及月經期. 健康對照30例，均來自中國醫(yī)學科學院皮膚病研究所研究生、體檢職工及皮膚外科整形美容的患者，男17例，女13例，年齡18~50歲（ 經統(tǒng)計學處理，年齡、性別與銀屑病患者組無統(tǒng)計學差異 ）. 對符合上述入選標準的患者詳細記錄病史資料，進行血常規(guī)檢查，征得患者本人同意后自肘靜脈取血8mL加入肝素抗凝管備分離，標本收集完畢后根據(jù)患者病情給予相應的抗銀屑病藥物治療［1］至皮損消退70%以上時再次進行血常規(guī)檢查，取療后血，并再次記錄患者的PASI評分，共收集到治療后患者16例（男9例，女7例，年齡22~58歲）.

Hema 480基因擴增儀（珠海黑馬醫(yī)學儀器有限公司），TFX20M紫外檢測儀（Vilber lourmat法國），CS9000雙波長飛點薄層掃描儀（日本島津），TRIzol （GIBICO/BRL）， SuperScriptTM FirstStrand Synthesis System for RTPCR（ Invitrogen ）. 特異性引物CXCR3 5′ TCCTTGAGGTGAGTGACCACAAA3′， 5′CTCGTCGTGGTGGGCCGACAG3′，擴增片段為584 bp；β肌動蛋白5′CAACTCCATCATGAAGTGGTAAC3′，5′CCACACGGAGTACTTGCGCGCCTC3′，擴增片段為180 bp. 由上海生工生物工程技術服務有限公司合成.

1.2方法用RTPCR方法檢測淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3的基因表達水平. 用60 g/L葡聚糖溶液沉降紅細胞，淋巴細胞分層液分離淋巴細胞與中性粒細胞，顯微鏡下記數(shù)2×106個細胞. 總RNA提取試劑TRIzolTM提取淋巴細胞與中性粒細胞總RNA. 紫外分光法檢測RNA純度，TBE/瓊脂糖電泳檢測RNA的完整性. 嚴格按照Invitrogen的試劑盒說明書進行操作反轉錄合成cDNA. 以cDNA為模板建立PCR反應體系：反應總體積為25 μL，反應程序為： 94℃變性45 s， 57℃退火45s， 72℃延伸1 min，首次循環(huán)94℃預變性5 min，共進行35個循環(huán)，最后72℃延伸7 min. 以β肌動蛋白作為內參照進行半定量，CXCR3與β肌動蛋白同管擴增. PCR產物用20 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測，以每厘米膠長5 V的電壓進行電泳，50 min后在紫外檢測儀上觀察結果并進行近距離攝影，用薄層掃描儀掃描膠片，基因表達水平以內參照β肌動蛋白基因為基準校正后獲得.

統(tǒng)計學處理： 采用SPSS10.0軟件處理，數(shù)據(jù)以x±s表示，治療前后數(shù)據(jù)用配對資料t檢驗分析，基因表達量用OneWay ANOVA (單因素方差分析)方法，兩兩比較用最小顯著差數(shù)法（Leastsignificant difference）檢驗. 相關性分析采用Pearson線性相關. P

2結果

治療前患者的PASI評分為8.4~47.2（27.3±8.8）. 所收集到的治療后患者的PASI評分為1.2~15.3（5.0±3.9），經統(tǒng)計學分析，比相應患者治療前的PASI評分(10.8~47.2， 25.6±10.8)下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P

進行期斑塊狀銀屑病患者淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的平均表達水平見表1及圖1. 銀屑病患者治療前外周血淋巴細胞中CXCR3 mRNA表達水平明顯高于健康對照組(P

表1外周血淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的表達水平（略）

aP

A： 淋巴細胞；B： 中性粒細胞. M: 100 bp marker; 1~2: 銀屑病患者治療前; 3~4: 健康對照; 5~6: 銀屑病患者治療后. 180 bp: 內參照β肌動蛋白; 584 bp: CXCR3.

圖1淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3 mRNA的電泳圖（略）

3討論

銀屑病是一種在多基因遺傳背景下、受多種內外環(huán)境因素刺激和誘導的自身免疫性慢性炎癥性皮膚病. 免疫異常在銀屑病的發(fā)病機制中起到核心作用，參與銀屑病皮損部位免疫反應的細胞主要涉及淋巴細胞、角質形成細胞、抗原提呈細胞等，而細胞因子是各種免疫細胞之間相互作用的樞紐［3-4］.

現(xiàn)認為銀屑病是一種T細胞介導的自身免疫性疾病. 在體外，銀屑病患者外周血單個核細胞具有促進自身角質形成細胞生長的作用［5］，提示銀屑病表皮的病理變化也與淋巴細胞的過度活化有關；細菌超抗原介導的銀屑病發(fā)病機制與T淋巴細胞活化有關，有研究［6］顯示極微量的鏈球菌M6蛋白可引起點滴狀銀屑病患者外周血單一核細胞明顯增殖，導致Th1型細胞因子IFNγ明顯增加. T細胞介導的免疫異常在銀屑病的發(fā)病機制中起到核心作用，T細胞不只局限于真皮，而且進入表皮諸層，參與銀屑病發(fā)病的T細胞主要為活化的I型T細胞，表皮主要為Tc1細胞，真皮主要為Th1細胞. 細胞因子是細胞之間相互作用的主要介質，在銀屑病皮損部位，T細胞、抗原提呈細胞、角質形成細胞等通過細胞因子、趨化因子發(fā)生相互作用，而且其間的關系變得復雜而紊亂［7］. 隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)由抗原提呈細胞與自然殺傷細胞介導的天然免疫及由T細胞介導的獲得性免疫在銀屑病患者中發(fā)生紊亂，二者相互作用，導致細胞因子、趨化因子及生長因子產生，進而導致皮損部位炎癥細胞浸潤及炎癥網絡的逐級放大，最終導致銀屑病特有的浸潤性鱗屑性紅斑發(fā)生［8］.

趨化因子及其受體系統(tǒng)在炎癥細胞自毛細血管向皮損部位的遷移過程中起到至關重要的作用. Goebeler等［2］的研究結果顯示趨化因子Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達并在真皮頂端呈簇集分布，與T細胞及巨噬細胞在銀屑病皮損頂部的浸潤模式相一致， 由于Mig具有活化及趨化T細胞的能力，推測真皮頂端是T細胞外滲繼而移入表皮的首選部位，由于某一時段中只有部分皮損部位的真皮表達Mig，提示T細胞的外滲和遷移受時間的限制并呈周期性. Mig的特異性受體為CXCR3， CXCR3主要表達于Th1細胞亞群，這與銀屑病皮損部位浸潤的主要T細胞亞群相一致. 有報道CXCR3在銀屑病皮損部位皮膚中升高，主要表達于真皮CD3+淋巴細胞［9］.

我們的研究結果表明趨化因子受體CXCR3在銀屑病外周血淋巴細胞中的表達增高并與PASI呈正相關，并且隨著病情的好轉而下降，結合文獻報道，推測CXCR3可能通過與其特異性配體Mig結合，參與了淋巴細胞向皮損部位的移行及皮損炎癥狀態(tài)的維持，其機制可能涉及包括參與細胞信號轉導途徑在內的多環(huán)節(jié)調節(jié)，使細胞之間及細胞與細胞外基質之間的結構發(fā)生改變而更加符合炎癥細胞遷移的需要，從而在銀屑病的發(fā)病機制中起著重要作用.

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篇10

【關鍵詞】 系膜增生性腎小球腎炎;腎病綜合征;外周血淋巴細胞;Bax;凋亡

)Abstract： Ojective To investigate the relationship between expression of Bax protein and apoptosis in peripheral blood lymphocytes (PBLs) in children with primary nephrotic syndrome (NS) with the pathology type of mesangial proliferative glomerulonephritis (MsPGN)， so to further explore the mechanism of glucocorticoid-resistance in children. Methods The PBLs in MsPGN-NS and normal children were isolated with Ficoll-Hypaque gradient centrifugation. Then they were treated with phytohemagglutinin (PHA) or PHA plus dexamethasone (Dex). At the 24th and 48th hour of culture， the expression levels of Bax protein and apoptosis proportion were measured by flow cytometric analysis. Results The Bax protein levels in PBLs of Dex in the control group were much higher than those in both the MsPGN-NS group and normal children (P24 h). However， at each time point the Bax protein levels of Dex group in MsPGN-NS children were all lower than those in normal children (P

Key words：mesangial proliferative glomerulonephritis (MsPGN); nephrotic syndrome; peripheral blood lymphocytes (PBLs); Bax; apoptosis已換

糖皮質激素(glucocorticoid，GC)是治療腎病綜合征(nephrotic syndrome，NS)的首選藥物，但臨床上部分NS患兒由于對GC抵抗，致使反復應用GC和免疫抑制劑，從而出現(xiàn)很多藥物不良反應和(或)并發(fā)癥，加重了原有的病理損害。因此NS患兒GC抵抗的原因一直是研究的熱點[1-5]。系膜增生性腎小球腎炎(mesangial proliferative glomerulonephritis，MsPGN)是兒童原發(fā)性NS較常見的病理類型之一，也是最常見的對GC不敏感的病理類型，臨床治療較為困難。免疫功能紊亂可能在MsPGN患兒發(fā)病機制中起著重要作用。本實驗采用Bax蛋白表達及外周血淋巴細胞(PBLs)凋亡率來觀察系膜增生型NS中GC抵抗的可能機制。

1 資料和方法

1.1 研究對象 本實驗所選患者為門診隨訪和定期住院進行環(huán)磷酰胺沖擊治療(3個月和半年一次)的原發(fā)性NS患兒，他們均是初治時對GC不敏感，而行腎活檢術，病理類型證實為MsPGN，36例，其中男23例，女13例，平均年齡10.6歲，所有入選兒童近期無感染性疾病，部分患兒已停用GC 3個月以上或現(xiàn)口服強的松最大量為5 mg，隔日1次。正常兒童(無感染性疾病、變態(tài)反應性疾病、外傷等)30例，男18例，女12例，平均年齡11.6歲。于2004年8月—2005年2月采血，檢測地塞米松(Dex)處理不同時間(24 h、48 h)后Bax蛋白表達水平與PBLs凋亡情況。

1.2 試劑 小鼠抗人Bax單抗購自北京萊博生物技術研究所;AnnexinⅤ/PI凋亡檢測試劑盒購自北京寶賽生物技術有限公司;RPMI1640、植物血凝素(PHA)、新生牛血清、地塞米松等均為北京華美生物工程公司進口分裝。

1.3 主要儀器 二氧化碳培養(yǎng)箱為美國UVP公司產品，流式細胞儀(FCM)由美國Calibur公司生產。

1.4 方法

1.4.1 淋巴細胞分離與培養(yǎng) 密度梯度離心法常規(guī)分離淋巴細胞，調備細胞數(shù)為1×109/L，用含10%小牛血清和雙抗的RPMI1640完全培養(yǎng)基分組進行細胞培養(yǎng)。對照組為細胞懸液+PHA，處理組為細胞懸液+PHA+Dex，置37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h。

1.4.2 Bax蛋白表達的檢測 取PBS調備的濃度為1×109/L的細胞懸液1 ml，用4%多聚甲醛固定15～20 min，1000 r/min離心10 min， 棄上清，沉淀用含0.1%Triton100和10%小牛血清的完全培養(yǎng)基洗滌1次，條件為1000 r/min離心10 min，而后加入Bax單抗(濃度均為1∶100)100 μl，混勻后室溫放置30 min，完全培養(yǎng)基洗滌2次，加入FITC-山羊抗鼠IgG(濃度為1∶100)100 μl，混勻后室溫避光放置30 min，完全培養(yǎng)基洗滌2次;沉淀用完全培養(yǎng)基0.5 ml重懸，送流式細胞儀檢測。

1.4.3 淋巴細胞凋亡的檢測 取PBS調備的濃度為1×109/L的細胞懸液1 ml，1 000r/min、4℃離心10 min，棄上清，加入1 ml冷的PBS，輕輕震蕩，使細胞懸浮，1000 r/min、4℃離心10 min，棄上清，再用冷PBS洗滌2次;將細胞重懸于200 μl結合緩沖液，加入10 μl AnnexinⅤ-FITC和5 μl PI，輕輕混勻，避光室溫反應15 min、4℃反應30 min，加入300 μl結合緩沖液，1 h內上機檢測。

1.5 統(tǒng)計學處理 所有數(shù)據(jù)用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進行分析，Bax蛋白表達水平以及凋亡率均以±s表示，兩組之間的比較用t檢驗，Bax蛋白表達量與凋亡率之間的關系應用相關分析，P

2 結 果

2.1 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs Bax蛋白的表達 ①MsPGN-NS患兒與正常兒童空白對照組PBLs經體外培養(yǎng)24和48 h后Bax的表達有所升高，Dex組Bax的表達則顯著增加(48 h>24 h);Dex組各時間點Bax蛋白的表達均顯著高于空白對照組(P0.05)，而Dex組Bax蛋白的表達則顯著低于正常兒童(P

2.2 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率 ①MsPGN-NS患兒與正常兒童空白對照組PBLs經體外培養(yǎng)24和48 h后凋亡率有所升高，Dex組凋亡率則顯著增加(P24 h);Dex組各時間點凋亡率均顯著高于空白對照組(P0.05)，而48 h凋亡率明顯低于正常兒童(P

地塞米松

作用時間腎病綜合征患兒組(n=36)對照組Dex組 正常兒童對照組表2 腎病綜合征患兒與正常兒童淋巴細胞凋亡百分比的比較與組內對照組比較：P

2.3 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率與Bax蛋白表達的相關性分析 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率與Bax蛋白的表達水平均呈明顯正相關(P

3 討 論

NS是一種免疫相關性疾病，按病理類型可分為微小病變和非微小病變2種類型。GC目前是治療NS的首選藥物，然而MsPGN-NS患兒大多表現(xiàn)為GC不敏感或耐藥，病情容易遷延反復。至今對于MsPGN-NS患兒GC治療的反應差異性仍沒有比較滿意的解釋。研究發(fā)現(xiàn)，不同病理類型的GC抵抗型NS患兒幾乎都存在PBLs凋亡受抑的情況。因此，本研究選擇MsPGN的GC抵抗型NS患兒為研究對象，以炎癥-免疫性疾病發(fā)病中淋巴細胞過度活化、增殖及凋亡不足等一系列免疫失衡機制為理論基礎，探討MsPGN-NS患兒GC抵抗的部分可能機制。

我們采用AnnexinⅤ/PI雙染法，流式細胞儀檢測細胞凋亡，此法的優(yōu)點是既可以檢測早期凋亡，又可將凋亡和壞死區(qū)分開來，較PI單染法具有更高的靈敏性和特異性，提高了實驗結果的可信度。研究結果顯示：MsPGN-NS患兒與正常兒童相比，體外培養(yǎng)淋巴細胞的自然凋亡率24 h無明顯差異(P>0.05)，而48 h MsPGN-NS患兒則低于正常兒童，差異有統(tǒng)計學意義(P

Bax是Bcl-2基因家族中重要的凋亡調控基因，也是Bcl-2家族中研究最廣泛的促凋亡蛋白。Bax定位于細胞質，作用于線粒體， Bax蛋白本身可以形成同二聚體，也可與Bcl-2、Bcl-Xl蛋白等形成異二聚體，對細胞凋亡起促進作用。Bax和 Bcl-2蛋白的比例決定了細胞接受凋亡信號后的命運，當Bax蛋白占優(yōu)勢時細胞發(fā)生凋亡，反之當Bcl-2蛋白表達增強時細胞繼續(xù)生存。

Bax在免疫系統(tǒng)發(fā)育與免疫調節(jié)中起著重要作用。許多自身免疫性疾病的發(fā)生都與Bax有關。Ogawa等[6]對干燥綜合征患者淋巴細胞凋亡與凋亡相關基因表達的研究結果表明干燥綜合征患者PBLs體外培養(yǎng)后T淋巴細胞凋亡數(shù)顯著增加，并且發(fā)現(xiàn)這與Bax表達增加、Bcl-2表達減少有關。崔玉芳等[7]用γ射線照射小鼠，觀察照射不同時間小鼠PBLs凋亡情況，從而探討其發(fā)生機制，結果發(fā)現(xiàn)照射早期小鼠PBLs凋亡率顯著升高，PBLs Bax蛋白表達水平也明顯增加，而后期隨著凋亡率的降低，Bax蛋白的表達也明顯下降。其他免疫相關性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、B細胞淋巴瘤、骨髓異常增生綜合征等淋巴細胞凋亡也與Bax表達水平有關。

本研究結果顯示：Dex可使MsPGN-NS患兒與正常兒童PHA刺激活化的PBLs Bax蛋白表達增加，與同一時間點空白對照組的自然表達相比有明顯差異(P24 h)，說明GC可誘導人PBLs Bax蛋白的表達。比較MsPGN-NS患兒與正常兒童Bax蛋白的表達，我們發(fā)現(xiàn)空白對照組各時間點Bax蛋白的表達無明顯差異(P>0.05)，但Dex組各時間點MsPGN-NS患兒Bax的表達均低于正常兒童(P

綜上所述，我們通過對MsPGN-NS患兒和正常兒童PBLs Bax蛋白的表達水平與凋亡率進行檢測，結果表明MsPGN-NS患兒存在PBLs凋亡受抑的情況，這與MsPGN-NS患兒Bax蛋白低表達有一定關系。提示Bax蛋白低表達是MsPGN-NS患兒GC抵抗的可能因素之一。

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